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技術(shù)分享丨微譜分析在細(xì)胞培養(yǎng)基中的應(yīng)用

更新時(shí)間:2023-12-08      點(diǎn)擊次數(shù):1640

細(xì)胞培養(yǎng)基是人工模擬細(xì)胞在體內(nèi)生長(zhǎng)的營(yíng)養(yǎng)環(huán)境,是促進(jìn)細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)和細(xì)胞生長(zhǎng)增殖的物質(zhì)基礎(chǔ)。細(xì)胞培養(yǎng)基是生物醫(yī)藥行業(yè)發(fā)展的基石,廣泛應(yīng)用于生物制藥研發(fā)和生產(chǎn)各個(gè)環(huán)節(jié),對(duì)生物醫(yī)藥行業(yè)的發(fā)展起著至關(guān)重要的作用。

根據(jù)培養(yǎng)基的物理形態(tài),可以將培養(yǎng)基分為固體培養(yǎng)基、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基。固體培養(yǎng)基是一類(lèi)配制成固體狀態(tài)的基質(zhì),根據(jù)特性又分為固化培養(yǎng)基、非可逆固化培養(yǎng)基、天然固態(tài)培養(yǎng)基等。液體培養(yǎng)基中80%~90%的成分都是水,其中含有可溶性和不可溶的營(yíng)養(yǎng)成分。半固體培養(yǎng)基是在液體培養(yǎng)基里面加入少量凝固劑配置成的半固體狀態(tài)的培養(yǎng)基。

細(xì)胞培養(yǎng)基的成分十分復(fù)雜,它的種類(lèi)可達(dá)上百余種。按照培養(yǎng)基化學(xué)特性的不同,可將上百余種成分分為水、氨基酸、維生素、糖類(lèi)、緩沖劑、表面活性劑、無(wú)機(jī)鹽、微量元素和其它輔助營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等,此外一些培養(yǎng)基還可能含有血清、血清替代物、pH指示劑等。 

目前為止,無(wú)血清、化學(xué)成分確定的細(xì)胞培養(yǎng)基正在逐漸成為研究與應(yīng)用的主流。主要優(yōu)勢(shì)如下

第一:增加確定性。生物實(shí)驗(yàn)往往需要追根溯源,化學(xué)組分的確定能夠增加試驗(yàn)的確定性,從而較受歡迎。

第二:性能一致。通過(guò)確定的配方,可以使每批產(chǎn)品質(zhì)量得到保障,性能一致。

第三:容易進(jìn)行純化和下游加工。含血清的培養(yǎng)基,純化工藝較為復(fù)雜。

第四:提高制品穩(wěn)定性。成分的確定為培養(yǎng)基儲(chǔ)存、運(yùn)輸條件、保質(zhì)期限帶來(lái)便利,提高了產(chǎn)品的穩(wěn)定性。

多方面的優(yōu)勢(shì),使得無(wú)血清、化學(xué)成分確定的培養(yǎng)基將成為未來(lái)主流的培養(yǎng)基。

微譜分析在細(xì)胞培養(yǎng)基中的應(yīng)用:微譜針對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)基具備豐富的分析經(jīng)驗(yàn),對(duì)于樣品理化性質(zhì)具有多種測(cè)試方法。根據(jù)培養(yǎng)基的鹽類(lèi)及微量成分,采用X射線(xiàn)熒光光譜儀(XRF)、X-射線(xiàn)衍射儀(XRD)進(jìn)行定性分析;采用離子色譜(IC)、電感耦合等離子體發(fā)射光譜儀(ICP-OES)、電感耦合等離子體質(zhì)譜儀(ICP-MS)可進(jìn)行定量分析,并且對(duì)于微量元素的檢出限可達(dá)1μg/kg。

培養(yǎng)基分析流程圖

針對(duì)樣品中種類(lèi)繁多且含量較低的有機(jī)小分子成分,采用核磁共振波譜儀(NMR)、質(zhì)譜(MS)、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀(GC-MS)、液相質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-MS)、液相三重四極桿質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-MS/MS)、高效液相色譜(HPLC)等多種測(cè)試手段進(jìn)行分析與含量的測(cè)定,液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜聯(lián)用儀(LC-MS/MS)的檢出限可達(dá)到5-50μg/kg級(jí)別。

針對(duì)樣品中可能存在的一些大分子物質(zhì),可以通過(guò)凝膠滲透色譜儀(GPC)、基質(zhì)輔助飛行時(shí)間質(zhì)譜儀(MALDI-TOF-MS)測(cè)試其分子量范圍,根據(jù)不同物質(zhì)的特性定量。

培養(yǎng)基分析流程圖

近些年來(lái),隨著培養(yǎng)基下游疫苗、基因治療、抗體藥物等迅速發(fā)展,中國(guó)細(xì)胞培養(yǎng)基市場(chǎng)的發(fā)展空間逐步擴(kuò)大,對(duì)于復(fù)雜培養(yǎng)基中有效成分的分析和精確定量尤為重要。

微譜通過(guò)多種儀器測(cè)試手段,以及對(duì)培養(yǎng)基體系豐富的物質(zhì)譜圖積累與團(tuán)隊(duì)解析經(jīng)驗(yàn),可分析各類(lèi)培養(yǎng)基中的成分組成、含量比例,幫助企業(yè)研究新型產(chǎn)品,縮短研發(fā)周期。如您有相關(guān)業(yè)務(wù)需求,歡迎前來(lái)咨詢(xún)!


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